作者:霍爾德科技 更新時間:2025-07-11
葉綠素a是估算浮游植物生物量的重要指標,可以通過測定水中浮游植物葉綠素a的含量,掌握水體的初級生產力情況和富營養(yǎng)化水平,在環(huán)境監(jiān)測中,葉綠素a含量是評價水體富營養(yǎng)化的指標之一。水質葉綠素a測定方法原理是將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類,研磨破碎藻類細胞,用丙酮溶液提取葉綠素,離心分離后分別于750nm、664nm、647nm和630nm波長處測定提取液吸光度,根據(jù)公式計算水中葉綠素a的濃度。下面小編分享一下水質葉綠素a測定的具體步驟。
1.制備水樣
在過濾裝置上裝好玻璃纖維濾膜。根據(jù)水體的營養(yǎng)狀態(tài)確定取樣體積,具體可以參考過濾水樣體積,用量筒量取一定體積的混勻水樣,進行過濾,最后用少量蒸餾水沖洗濾器壁。過濾時負壓不超過50kPa,在水樣剛剛完全通過濾膜時結束抽濾,用鑷子將濾膜取出,將有水樣的一面對折,用濾紙吸干濾膜水分。
2.研磨
將樣品濾膜放置于研磨裝置中,加入3ml-4ml丙酮溶液,研磨至糊狀。補加3ml-4ml丙酮溶液,繼續(xù)研磨,并重復1-2次,保證充分研磨5min以上。將完全破碎后的細胞提取液轉移至玻璃刻度離心管中,用丙酮溶液沖洗研缽及研磨杵,一并轉入離心管中,定容至10ml。
3.浸泡提取
將離心管中的研磨提取液充分振蕩混勻后,用鋁箔包好,放置于4℃避光浸泡提取2h以上,不超過24h。在浸泡過程中要顛倒搖勻2-3 次。
4.離心
將離心管放入離心機,以相對離心力1000×g(轉速 3000 r/min~4000 r/min)離心10min。然后用針式濾器過濾上清液得到葉綠素a的丙酮提取液(試樣)待測。
5.水樣測定
將試樣移至比色皿中,以丙酮溶液為參比溶液,于波長750nm、664nm、647nm、630nm處測量吸光度。750nm波長處的吸光度應小于0.005,否則需重新用針式濾器過濾后測定。
6.計算
最后水樣中葉綠素a的質量濃度可以按照相應公式進行計算得出。
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